ATCC細胞株污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細胞受細菌污染后,會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。污染后細胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,zui后變圓脫落死亡。
真菌污染是ATCC細胞株培養(yǎng)過程中zui常見的一種,zui常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培養(yǎng)細胞受真菌污染后,可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,有的散在生長,培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。真菌污染后,細胞生長變慢,但zui后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使ATCC細胞株脫落死亡。支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的zui小微生物,zui小直徑0.2μm,一般過濾除菌無法去除它,光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu)。開始不易發(fā)現(xiàn),能在偏堿條件下生存,對青霉素有抗藥性。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間。培養(yǎng)細胞受支原體污染后,部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢,部分細胞變圓,從瓶壁脫落。但多數(shù)細胞污染后無明顯變化,或略有變化,若不及時處理,還會產(chǎn)生交叉污染。
組織ATCC細胞株培養(yǎng)過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產(chǎn)生病毒污染。目前,從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞污染。目前,世界上已有幾十種ATCC細胞株都被HeLa細胞所污染,致使許多實驗宣告無效。非細胞培養(yǎng)物所造成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生,大多是由于細胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所致。
ATCC細胞株在酶免疫分析中的應(yīng)用 ATCC細胞株因子在免疫調(diào)節(jié)過程中扮演重要角色,由辣根過氧化物 酶標記的抗細胞因子單克隆抗體等試劑所建立的夾心ELISA 方法,可檢測人體體液中絕大部分微量存在 的細胞因子,對評價細胞因子參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理過程具有重要意義。ATCC細胞株還能用于微生物的鑒 別,應(yīng)用McAb 不僅能鑒別不同的病原體,還能鑒別相同病原體不同的種、型、亞型以及不同生活周期的抗 原性變化。流感病毒經(jīng)常發(fā)生變異,由此引起反復(fù)流行。單克隆抗體可分辨流感病毒微小變異,對流感快 速診斷,流行預(yù)測和疫苗的制備具有重要意義。
ATCC細胞株在定位檢測中的應(yīng)用 放射性核素99m Tc 等標記單克隆抗體,通過靜脈、腹腔或腰椎穿 刺等方式進入機體后,可特異性地與靶抗原結(jié)合,顯示抗原分子和組織細胞的機能狀態(tài)。這種檢測方法稱 為功能顯像,又稱為放射免疫顯像(radioimmunoimaging,RⅡ)。ATCC細胞株可進行腫瘤的分類和鑒別診斷,可確 定腫瘤的原發(fā)病灶及轉(zhuǎn)移部位,并可確定腫瘤大小。還可用于心肌壞死病灶的定位測定、血栓的定位 測定以及炎癥病灶的探測。