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  • 2016

    5-11

    細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存方法一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴,快速溶化,用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液,于1500轉(zhuǎn)/分,離心3分鐘。棄上清,再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀,再1500轉(zhuǎn)/分,離心3分鐘,棄上清,細(xì)胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻,備用。另取一個(gè)75cm2方瓶,加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì),將上述制備的含腫瘤細(xì)胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中,于37℃,5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),大約3-4天細(xì)胞基質(zhì)會(huì)變黃,5....

  • 2016

    4-15

    美國(guó)國(guó)家綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(NCCN)老年腫瘤指南中老年患者是指65歲以上的腫瘤患者。根據(jù)美國(guó)監(jiān)測(cè)、流行病學(xué)與zui終結(jié)果(SEER)數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)果顯示:在美國(guó)乳腺癌發(fā)病人群中,65歲以上老年患者占到近50%,70歲以上占47%。我國(guó)乳腺癌發(fā)病年齡具有年輕化特點(diǎn),老年患者所占比例達(dá)不到一半,但由于我國(guó)人口基數(shù)大,老年乳腺癌患者仍是一個(gè)很大群體,不能忽視?,F(xiàn)將老年乳腺癌患者的特點(diǎn)及近年各種治療的研究進(jìn)展作一綜述。1老年乳腺癌患者的特點(diǎn)1.1老年乳腺癌患者的生物學(xué)特性臨床發(fā)現(xiàn)雖然老年乳腺癌...

  • 2016

    1-7

    ATCC菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達(dá)到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。ATCC菌種保藏的方法有哪些呢?傳代保存法有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí),會(huì)很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存,它是zui基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產(chǎn)ATCC菌種的保存。傳代保存時(shí),培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的...

  • 2015

    10-27

    ATCC細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。ATCC細(xì)胞株一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細(xì)胞成單個(gè)細(xì)胞,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA是一種二價(jià)離子的螯合劑,能抑制細(xì)胞膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細(xì)胞消化液一般含有0.25%...

  • 2015

    10-21

    ATCC細(xì)胞株污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽ui常見的有革蘭氏陽(yáng)性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,zui后變圓脫落死亡。真菌污染是ATCC細(xì)胞株培養(yǎng)過程中zui常見的一種,zui常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,可見...

  • 2015

    9-26

    黑色素瘤細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞株能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞株數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞株種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞株進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型黑色素瘤細(xì)胞株直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞株需經(jīng)消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細(xì)胞株成單個(gè)細(xì)胞株,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA是一種二價(jià)離子的螯合劑,能抑制黑色素瘤細(xì)胞株膜上的Ca2+和Mg2+。常用的...

  • 2015

    7-26

    黑色素瘤細(xì)胞株是從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或原代培養(yǎng)物用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,克隆具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的單細(xì)胞獲得的細(xì)胞群,稱細(xì)胞株。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。描述一個(gè)黑色素瘤細(xì)胞株時(shí),必須說(shuō)明它的特殊性質(zhì)或標(biāo)志。與細(xì)胞系類似,如果不能繼續(xù)傳代或傳代代數(shù)有限,可稱為“有限細(xì)胞株(finitecellstrain)”。如果可以連續(xù)傳代,則可稱為“連續(xù)細(xì)胞株(continouscellstrain)”。再由原細(xì)胞株進(jìn)一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的...

  • 2014

    5-29

    LWnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞信息由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對(duì)于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株(ATCCCRL-2648)作對(duì)照。L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)...

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